在南京，能在知名度上與先鋒書店所媲美的只有大眾書局。大眾書局是老字號連鎖書店品牌，起源于1927年，時稱大眾書局行印館，建國后該品牌不再使用。2003年，大眾書局品牌被重新啟用，如今，大眾書局在江蘇省內多個城市、上海地區均設有門店。

南京旗艦店位于新街口國際貿易中心，2013年，店鋪遷址國藥大廈。國藥店總面積約6000平米，共設有三層，藏書10萬冊，包括文學、社科、經管、藝術等類型圖書，種類齊全。大眾書局的主陳列臺主要展示暢銷書，值得一提的是，書店對這類暢銷書細化分類，分為中國文學、外國文學、社科類、經管類、生活類五大類，每種類別單獨設置陳列臺，照顧了不同購書要求的讀者。大眾書局還設有港臺進口圖書展、本月新書展、暢銷書排行榜等區域。港臺進口圖書展中多為經典圖書或影視圖書，如《如何閱讀一本書》、《少年派的奇幻漂流》、《夏洛的網》等，暢銷書排行榜則展示了書店銷售量top100的圖書。

在大眾書局的所有圖書中，文學類占據多數。文學類根據作者國籍分為中國文學與國外文學，前者按照作者細分，所選圖書多來自于現當代經典作家，如魯迅、史鐵生、賈平凹等，后者則是按照國家作為分類標準。大眾書局專門設有部分作家主題展臺，展臺不定期更換，每個展臺上都有對該作家及其主要作品的簡單介紹。分類清晰是大眾書局的一大優點，除了根據圖書的類型不同設置分類之外，大眾書局也專門設有出版社書架，包括商務印書館、譯林出版社、人民文學出版社等。書店內設置了自助查詢系統，方便讀者查詢圖書。

大眾書局不定期開展活動，包括作家見面會、作家簽售會、主題書展、公益沙龍、親子故事會、贈書贈票等，形式多樣。書店曾邀請馬伯庸、石鐘山、安如意等名人作家親臨現場，與讀者面對面交流、分享。每家門店所舉行的活動不同，書店公眾號會發布活動預告，建議讀者事先關注。

大眾書局在南京開設了多家門店，店鋪之間在裝修設計上沒有太大差別，不過相比較之下，國藥店的所藏圖書數量更為可觀，種類更齊全，而新百店的線下活動更豐富，這兩家門店推薦前行。作為一家書店，大眾書局仍然存在一些不足之處，如閱讀位緊張、文創產品不多、環境吵鬧、書店內多推銷人員等。